合成着色剂是指人工化学合成方法所制成的有机色素，因其色彩鲜艳、着色力强、稳定性好、生产成本低等特点广泛应用于食品工业，但有些生产企业为了改良食品感观色泽，超限量、超范围使用合成着色剂，可能会对肝脏产生一定影响。

　　逗点生物结合自身产品优势，按照国标建立了固相萃取-高效液相色谱法测定硬糖和水果罐头中11种合成着色剂含量的方法，样品经乙醇胺水提取后，经Copure® PWAX混合型弱阴离子交换柱净化，采用高效液相色谱仪结合紫外检测器测定。

　　准确称取试样2g（精确至0.001g），置于50mL离心管中，先加入适量水(2mL~5mL)50℃水浴超声融化样品，再加入25mL乙醇氨水溶液，涡旋1min，50℃超声提取20min，8000转/分钟离心5min。

　　取上清液置于50mL离心管中，残渣中再加入5mL~10mL乙醇氨水溶液重复提取至上清液无明显颜色，离心后合并上清液，用乙醇氨水溶液定容至50 mL，即得提取液。

　　准确吸取提取液10mL，50℃氮气浓缩至2mL左右，分2~3次共加入10mL 5%甲醇水溶液溶解，调节pH至6.0左右，作为待净化液。

　　先依次用6mL甲醇和6mL水活化Copure® PWAX固相萃取柱（150mg/6mL，货号：COPWAX6150），保持柱体湿润，将待净化液注入柱中，控制流出液流速在1滴/秒，弃去流出液。再依次用6mL 2%甲酸水和6mL甲醇淋洗，弃去淋洗液，抽干小柱。

　　最后用6mL 2%氨化甲醇洗脱，分两次加入，收集洗脱液，于50 ℃氮吹至近干。准确加入2mL pH=9的乙酸铵溶液溶解，过0.22μm 亲水PTFE滤膜，弃去2~5滴初滤液，取续滤液作为待测液。

　　Copure® PWAX混合型弱阴离子交换柱150mg/6mL，货号：COPWAX6150

　　1.3.1过程空白：取一支洁净的50 mL离心管，不称取试样，按照上述1.1和1.2进行提取、净化，浓缩，取续滤液上机测试。

　　1.3.2空白本底实验：称取试样2 g（精确至0.001 g）按照上述1.1和1.2进行提取、净化，浓缩，取续滤液上机测试。

　　3）过柱前测下样液的pH值，调节至6.0，因为PWAX属于混合型弱阴离子交换反相吸附柱，上样时需要酸性条件。

　　5）50°C氮气浓缩至近干，准确加入2 mLpH为9.0的乙酸铵缓冲溶液复溶，酸性条件下赤藓红回收率低。

　　6）上机之前过滤所用的滤膜不得使用尼龙滤膜，因为尼龙的化学成分是聚酰胺，会吸附合成着色剂，要用亲水PTFE。